《分子生物学实验》教学大纲
一、实验目的与要求：
分子生物学实验是生物技术专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合分子生物学的教学而开设的。实验过程中,首先将有关的基本原理、基本技术和方法给学生做一介绍，然后将分子生物学实验中要用到的仪器以课件的形式展示给学生，在学生掌握了以上基本知识的基础上给定实验内容和目的,让学生自行设计实验方案并完成,得出一定的实验结论。希望通过本实验培养学生主动学习、学以致用、独立思考的能力。
二、实验项目与提要：
序号 | 实验项目 | 必做 选做 | 时数 | 内 容 提 要 | 实验 类型 | 每套仪 器人数 |
1 | 从动物全血中分离提取DNA | 必做 | 8 | ① 低温离心机的使用方法② Tris-饱和酚法从动物血液中分离DNA ③ DNA的电泳检测 | 综合性实验 | 10人 |
2 | 从植物叶片中分离提取DNA | 必做 | 6 | ① DNA提取原理 ② SDS法提取植物总DNA ③ DNA的电泳检测与纯度的测定 | 综合性实验 | 10人 |
3 | 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 必做 | 6 | ① 受体菌的培养 ② 感受态细胞的制备 ③ 转化 | 综合性实验 | 10人 |
4 | 质粒的提取 | 必做 | 6 | ① 质粒DNA分离的原理 ② 碱变性法提取质粒DNA ③ DNA浓度与纯度的测定 | 综合性实验 | 10人 |
5 | 基因组DNA的酶切消化及其产物的分离纯化 | 必做 | 8 | ① 基因组DNA的酶切消化 ② 基因组DNA的酶切产物的电泳分析 ③ 基因组DNA的酶切产物的纯化 | 综合性实验 | 10人 |
6 | 核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 必做 | 6 | ① 聚丙烯酰胺凝胶的配制 ② 垂直电泳槽的拆装 ③ 聚丙烯酰胺凝胶的染色与分析 | 综合性实验 | 10人 |
7 | PCR-SSCP技术 | 必做 | 8 | ① SSCP分析样品的制备 ② 电泳与染色 ③ SSCP带型的判定与分析 | 综合性实验 | 10人 |
8 | PCR-SSR技术 | 必做 | 6 | ① SSR分析样品的制备 ② 电泳染色 ③ SSR带型的判定与分析 | 综合性实验 | 10人 |
9 | PCR－RFLP 技术 | 必做 | 6 | ① 目的片段的扩增与限制性酶切 ② 酶切产物的琼脂糖电泳 ③ 凝胶成像与带型分析 | 综合性实验 | 10人 |
10 | 凝胶中DNA片段的回收与纯化 | 必做 | 4 | ① DNA片段琼脂糖凝胶电泳 ② 利用DNA回收试剂盒进行凝胶中DNA片段的回收与纯化 | 综合性实验 | 10人 |
11 | DNA指纹的制备与应用 | 必做 | 4 | ① 基因组DNA的限制性酶切 ② 酶切产物的电泳与转膜 ③ 微卫星探针杂交 ④ DNA指纹带型分析 | 综合性实验 | 10人 |
12 | Southern Blotting | 必做 | 4 | ①Southern Blotting准备②Southern Blotting实验操作演示 | 综合性实验 | 10人 |
三、成绩考核方法：
1.平时成绩：平时成绩占30%，包括出勤、课堂提问、讨论等；
2.试卷成绩与实践成绩：试卷成绩（期终考试成绩）占40%，实践成绩（实验报告）占30%；
3.综合考核成绩的计算：平时成绩+实验报告成绩+期终考试成绩。
四、教材及主要参考书：（提供2-6种）
1.教材：
陈宏，《分子生物学实验技术》，自编教材，2005
2.主要参考书：
Sambrook, J. and Russell, D.W,《分子克隆实验指南》(上、下) (第三版), 科学出版社, 2002.
杨安钢等，《生物化学与分子生物学实验技术》, 高等教育出版社, 2001.
F.M.奥斯伯等，《精编分子生物学实验指南（第四版中译版）》，科学出版社 2005
魏群，《分子生物学指导》，高等教育出版社；施普林格出版社, 1999.
撰写人：张春雷审核人：陈宏 李宗芸
