《细胞生物学实验》教学大纲

文章作者:  发布时间:2016-01-09

《细胞生物学实验》教学大纲

、实验目的与要求:

  细胞生物学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程,是一门独立的实验课程,同时也是为了配合细胞生物学的教学而开设的一门实验课程,本课程由演示性、验证性、操作性和综合性等多层次实验内容构成,目的在于巩固和加深学生对细胞生物学知识的理解、验证细胞生物学学理论、并初步掌握细胞生物学研究所必需的基本实验技术。在此基础上,进行一定比例的综合性、设计性实验,将实验理论和实验技能融为一体,从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。

  本实验课中的验证性实验主要通过老师示教后由学生完成,综合实验在教师指导下由学生自己动手完成,同时,要求学生根据所掌握的理论基础和实验技能,自行设计实验,经教师认可后独立完成实验操作,并撰写研究报告。

二、实验项目与提要:

序号

实验项目

必做

选做

时数

内 容 提 要

实验

类型

每套仪

器人数

1

特殊光学显微镜的结构、工作原理及其使用

必做

3

1、四种特殊光学显微镜特殊部件的构造及调节

2、四种特殊光学显微镜的使用及注意事项

3、四种特殊光学显微镜的用途

4、学生使用四种特殊光学显微镜

验证性

6

2

DNA的原位显示—福尔根染色

必做

3

1、取洋葱根尖于小烧杯中用1N盐酸60℃水浴中水解8分钟

2、用蒸馏水洗去盐酸

3、Schiff液染色30分钟

4、用新配制的亚硫酸氢钾洗3次,直至出现红色

5、用蒸馏水洗5分钟

6、4.5%醋酸于载玻片,将根尖放于其中压片

7、镜检

验证性

2

3

细胞内过氧化物酶的显示

必做

3

1、处死小白鼠取股骨,用微量注射器吹出骨髓细胞于载玻片上,涂片,晾干

2、0.5%硫酸铜中固定30

3、冲洗

4、0.2%联苯胺中氧化3分钟

5、冲洗

6、1%番红染色1分钟

7、冲洗,晾干

8、镜检

验证性

2

4

细胞融合实验

必做

3

1、鸡红细胞悬液的制备

2、离心洗涤3后加入3毫升GKN溶液

3、计数,稀释至每毫升15万个

4、1毫升上述悬液加2毫升50%PEG,混匀

5、30水浴中30分钟

6、镜检

验证性

2

5

细胞膜的通透性观察

必做

3

110%兔血红细胞的制备

2、溶血现象的观察

3、观察兔血红细胞对各种物质的通透性(氯化钠溶液、氯化铵溶液、葡萄糖、硝酸钠、乙醇、草酸铵)

验证性

6

6

细胞凝集反应

必做

3

1、取材:去皮土豆

2、凝集素粗提液制备

3、鸡和兔红细胞悬液制备

4、凝集素粗提液与鸡和兔红细胞悬液各一滴,20分钟

5、镜检

验证性

2

7

线粒体的超活染色与观察(

必做

3

1、取材:洋葱鳞茎内皮细胞:

2、染色:詹纳斯绿染色

3、制片

4、镜检

验证性

1

8

细胞器的分离与观察

必做

3

1、制备鼠肝细胞匀浆

2、差速离心

3、分离物鉴定

验证性

4

9

细胞骨架的显示观察

必做

3

取材:洋葱鳞茎内皮细胞入PBS液中处理5分钟

2、抽提:吸去PBS,用曲通10037水浴处理30分钟

3、冲洗:吸去曲通,用缓冲液洗3次,每次5分钟

5、固定:3%戊二醛固定20分钟

6、冲洗:弃戊二醛后,用PBS液洗3次,每次5分钟

7、染色:吸去PBS,用0.2%考马斯亮蓝染色10分钟

8、制片:倒去染液,用蒸馏水洗3次,铺展开,加盖玻片

9、镜检

验证性

1

10

联会复合体的染色和观察

必做

3

1、处死小鼠,取睾丸

2、剪开白膜,剪碎曲细精管并轻轻吹打

3、低渗1小时

4、低渗终止前10分钟加福尔马林

5、离心

6、固定

7、滴冰片

8、银染

9、镜检

验证性

2

11

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活动过程观察

必做

6

1、免疫小白鼠

2、4-6天后注射鸡红细胞

3、20-30分钟处死小白鼠,取腹腔掖

4、计数与稀释

5、涂片

6、固定

7、染色

8、镜检

验证性

2

12

小鼠骨髓细胞的微核诱导

选做

9

根据细胞生物学理论课所学知识,就该课题设计出实验方案,锻炼学生的动手、动脑能力

综合设计性

6

13

动物外周血淋巴细胞染色体制备

选做

9

根据细胞生物学理论课所学知识,就该实验课题设计出实验方案,锻炼学生的动手、动脑能力

综合设计性

6

三、成绩考核方法:

1.平时成绩20%:包括出勤+课堂提问

2.实验成绩40%:包括实验操作+实验报告+实验结果+综合设计性实验

3.试卷成绩40%:期末考试成绩

4.综合考核成绩的计算:平时成绩20%+实验成绩40%+试卷成绩40%

四、教材及主要参考书:

《细胞生物学实验》杨汉民主编高等教育出版社 1997

《细胞生物学实验》辛华主编科学出版社 2001

《细胞生物学实验指导》李素文主编高等教育出版社施普林格出版社2001

《细胞生物学实验教程》王金发等主编科学出版社 2004

《细胞生物学与遗传学实验指导》金龙金浙江大学出版社 2005

撰写人: 张艳华 审核人:张子峰

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