《生物化学实验》教学大纲
一、实验目的与要求：
生物化学实验是生物学所有专业的一门专业基础课程，是一门独立的实验课程，同时也是为了配合生物化学的教学而开设的一门实验课程, 本实验通过比色、层析、电泳等基本实验技术(包括实验方法、操作技术和一些基本仪器的使用等)，分析研究糖、脂、蛋白质、核酸、酶等生化物质及代谢过程，培养学生具有初步的科学实验能力及严格的科研作风，同时验证生化的某些基本理论知识，加深感性认识。在此基础上，进行一定比例的综合性、设计性实验，将实验理论和实验技能融为一体，从而培养学生的基本实验思想、实验方法、实验技能和综合应用能力。
二、实验项目与提要：
| 序号 | 实验项目 | 必做 选做 | 时数 | 内 容 提 要 | 实验 类型 | 每套仪 器人数 |
1 | 总糖的测定——蒽酮比色法 | 必做 | 3 | 1.分光光度计的原理及操作方法 2.测定材料的准备 3.标准曲线的制作 4.样品含量的测定 | 验证性 | 2 |
2 | 蛋白质的两性电解质性质及等电点的测定 | 必做 | 3 | 1.蛋白质的两性电解质性质原理 2.不同pH体系的配制 3.蛋白质等电点的测定 | 验证性 | 2 |
3 | 双缩脲法测定蛋白质含量 | 必做 | 3 | 1.双缩脲法测定蛋白质的原理 2.标准曲线的制作 3.样品的测定 | 验证性 | 2 |
4 | 考玛斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量（选） | 选做 | 3 | 1.考玛斯亮蓝G-250法测定蛋白质的原理介绍 2.标准曲线的制作 3.样品的测定 | 验证性 | 2 |
5 | 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白 | 必做 | 3 | 1.蛋白质电泳的一般原理介绍 2.电泳装置的介绍 3.点样 4.上样 5.醋酸纤维素薄膜电泳 | 验证性 | 2 |
6 | 酶的性质 | 必做 | 6 | 1. 温度对酶活力的影响 2. pH对酶活性的影响 3. 唾液淀粉酶的活化和抑制结果分析 4. 酶的专一性 | 验证性 | 2 |
7 | 维生素C的定量测定 | 必做 | 3 | 1.分光光度法测定维生素C的原理介绍 2.样品材料的准备 3.标准曲线的制作 4.样品中Vc含量的测定 | 验证性 | 2 |
8 | 核酸的提取及性质鉴定 | 必做 | 12 | 1．资料查询 2．确定材料 3．设计实验 4．提交实验可行性报告 5．具体实验操作 （1）核酸的分离 （2）琼脂糖凝胶电泳检测 （3）纯度鉴定和含量测定 6．撰写实验报告 | 设计性 | 2 |
9 | 纤溶酶的纯化与鉴定 | 必做 | 12 | 1．粗酶液的抽提 2．上清用60%饱和度的硫酸铵盐析 3．透析脱盐或者SephadexG-15脱盐 4．SephadexG-100凝胶层析分离粗品 5．聚丙烯酰胺凝胶电泳对纤溶酶进行纯化和鉴定 | 综合性 | 2 |
10 | 脂肪酸的β-氧化 | 必做 | 3 | 1.脂肪酸的β—氧化测定的基本原理介绍 2.样品的处理 3.酮体的测定 4.结果计算 | 验证性 | 2 |
11 | 氨基酸转移作用与层析法鉴定 | 必做 | 6 | 1．纸层析法的基本原理介绍 2．转氨酶的提取 3．转氨反应 4．苯酚水平层析验证转氨反应 5．结果分析 | 验证性 | 2 |
三、成绩考核方法：
1.平时成绩：占总成绩50%（包括出勤、提问、实验操作及报告等）；
2. 试卷成绩：占总成绩50%（试卷成绩）；
3.综合考核成绩：平时成绩50%+试卷成绩50%＝100％。
四、教材及主要参考书：
1.教材：
《基础生物化学实验》白玲，复旦大学出版社 2004年
2.主要参考书：
《生物化学实验原理和方法》李建武等北京大学出版社 1994
《生物化学与分子生物学实验技术教程》杨建雄，科学出版社 2002
《生化实验方法和技术》（第二版）张龙翔等，高等教育出版社 1997
撰写人：刘美艳 审核人：朱爱华
